Sylabus
* Pondělí
- Úvod do buněčné biologie - tkáňově specifické a kmenové buňky, teorie kmenových buněk, využití buněk ve tkáňovém inženýrství.
- Bezpečnost v laboratoři, sterilní práce s buňkami a tkáňovými kulturami.
- Orientace v laboratoři zpracovávající buněčné kultury - laminární box, centrifuga, inkubátor.
* Úterý
- Embryonální a indukované pluripotentní buňky a jejich využití v medicíně.
Seminář
- izolace MSC z kostní dřeně potkana, ustanovení primokultury rMSC (video s komentářem) (15 min)
- důležité parametry primárních kultur, význam použitých látek a reagencií (medium, FBS, PBS, trypsin), charakteristika MSC (25 min)
Praktické cvičení
- práce ve flow boxu, příprava materiálů pro tkáňové inženýrství (nanovlákna, hydrogely, hydroxyapatit) a rMSC nebo GFP rMSC kultivace buněk (media, pasážování, počítání, mikroskopie...)
- příprava media (15 min)
- kontrola konfluentní kultury (10 min)
- pasážování, počítání buněk (20 min)
- nasazování na kultivační misky (10min)
* Středa
- Hematopoetické kmenové buňky, jejich příprava, zamražování, banka pupečníkové krve a využití v praxi.
- Neurální kmenové buňky, izolace, charakterizace a využití v experimentech.
Seminář 1
- využití biomateriálů pro implantace do modelů míšních poranění implantace biomateriálu do míšní léze (hemisekce) potkana, video s komentářem (30 min)
Seminář 2
- balonková kompresní léze míchy potkana video s komentářem (15 min)
- testy pro hodnocení zlepšení motorických a senzorických funkcí potkana po SCI, video s komentářem (20 min)
* Čtvrtek
- Mezenchymální buňky derivované z kostní dřeně a tukové tkáně.
- Značení kmenových buněk pomocí nanočástic železa a jejich zobrazování in vivo pomocí magnetické resonance.
Praktické cvičení
- mikroskopie a mikrofotografie kultur a případně osídlených vzorků nanovláken a hydrogelů z úterý, pozorování rozdílů (20 min) mikrofotografie nanovláken a cytoskeletu na preparátech (phalloidin, DAPI) (10 min)
- využití softwaru pro analýzu obrazu - Image J (počítání buněk, plochy) demonstrace využití Image J na mikrofotografiích různých hydrogelů, rozdíly (10 min)
- mikrofotografie nanovláken, význam struktury hydrogelů, orientace nanovláken (10 min) stručne konfokální mikroskop, data, 3D obrázky (15 min)
- test (20 min)
* Pátek
- Klinické studie s buněčnou terapií, příprava buněk podle správné výrobní praxe (GMP).
Praktická cvičení Čisté prostory.
Anotace
Embryonální, fetální, mezenchymální a tkáňově specifické kmenové buňky; teoretické základy, vývoj v oboru.
Praktické aplikace kmenových buněk v terapii závažných onemocnění.