Sylabus
Vyučující: prof. MUDr. Stanislav Filip, Ph.D. prof. MUDr. Jaroslav Mokrý, Ph.D. prof. MUDr. Pavel Žák, Ph.D.
MUDr. Tomáš Soukup, Ph.D. doc. MUDr. Jakub Suchánek, Ph.D.
Přednášky:
Úvod do studia regenerativní medicíny, regenerace a reparace. Buněčná terapie. Kmenové buňky - úvod, základní pojmy. Plasticita kmenových buněk. Etika a morální aspekty kmenových buněk. Referáty.
Pluripotentní kmenové buňky, ES buňky, iPS buňky. Epitelové kmenové buňky. Nádorové kmenové buňky. Svalové kmenové buňky a regenerace svalových tkání. Referáty.
Neurální kmenové buňky. Niché neurálních kmenových buněk - mikroskopování. Regenerace nervového systému. Míšní poranění. Referáty.
Endotelové progenitorové buňky. Hemopoetické kmenové buňky. Hematologické aplikace, transplantace kostní dřeně. Referáty.
Mezenchymové kmenové buňky. Kmenové buňky zubní pulpy. Separační techniky. Mezibuněčné interakce. Růstové faktory. Referáty.
Nosiče (2D, 3D) - přírodní, artificiální. Enkapsulace. Nanotechnologie. Migrace buněk. Diferenciace buněk. Buněčné transplantace. Tkáňové inženýrství kostní a chrupavčité tkáně; aplikace v ortopedii.
Praktická cvičení a semináře:
Tkáňové inženýrství. Niché kmenových buněk - vyšetření histologických preparátů. Provoz laboratoře tkáňových kultur. Hygienický režim. Materiálně-technické zabezpečení. Příprava pufrů a transportních médií, nácvik práce s mikropipetami. Mikroskop s fázovým kontrastem.
Základy kultivace lidských buněk. Izolace buněk z lidských / živočišných tkání. Techniky enzymatické disociace. Počítání buněk. Kryokonzervace. Matematika v laboratoři - počet populačních zdvojení, kinetika.
Izolace buněk. Primokultury. Pasážování. Kultivační povrchy. Základní biologické charakteristiky a jejich stanovení. Separace buněk. Gradientová centrifugace (Ficoll, Percoll). Metodiky imunomagnetické separace.
Kultivační protokoly. Diferenciace buněk in vitro. Analýza extracelulární matrix diferencovaných buněk. Protokol fenotypizace.
Návštěva laboratoře pro kultivace kmenových buněk Test viability buněk. Příprava buněk pro analýzu v průtokové cytometrii
Anotace
Předmět navazuje na znalosti cytologie. Studenty seznamuje s diskutovanými tématy současnosti, jakými bezpochyby jsou: kmenové buňky, buněčné kultury v biomedicíně, buněčná terapie, regenerativní medicína, tkáňové inženýrství apod.
V praktických cvičeních jsou studenti obeznámeni se základy práce v laboratoři tkáňových kultur a s detekčními metodami.