Sylabus
Úlohy řešené v praktiku :
1. Detekce cytoskeletu v rostlinných buňkách (imunofluorescenční mikroskopie, Western blot)
2. Exprese a afinitní purifikace rostlinného rekombinantního proteinu v bakteriích.
3. Transientní exprese bílkoviny značené GFP po infiltraci listů tabáku.
4. Transientní exprese vneseného genu v tabákových protoplastech (detekce exprese s využitím GFP značky).
5. Transformace Arabidopsis (in situ infiltrace květenství suspenzí Agrobacteria, selekce transgenních rostlin).
6. Detekce indukce genové exprese v rostlinných buňkách (reporterový gen pod regulovaným promotorem).
7. Detekce transgenu v rostlinách (izolace DNA, PCR, detekce produktů).
8. Klonování a mutageneze in silico (seznámení se základními bioinformatickými nástroji).
Anotace
Cílem kursu je prakticky i teoreticky seznámit studenty s vybranými moderními metodami buněčné a molekulární biologie rostlin, zejména s metodami studia genové exprese v rostlinném materiálu, transientní expresí vnesených genů v rostlinných buňkách a protoplastech a přípravou a analýzou transgenních rostlin.
Kurs je určen zejména posluchačům magisterského stupně studia a doktorandům, kteří hodlají některé z okruhu probíraných metodických přístupů využívat v experimentální práci.