Sylabus
1. Fyzikální základy elektronové mikroskopie
2. Instrumentační základy transmisní elektronové mikroskopie (TEM) Ovládání transmisního elektronového mikroskopu
3. Instrumentační základy řádkovací (skanovací) elektronové mikroskopie (SEM) Ovládání řádkovacího elektronového mikroskopu
4. Preparační technika pro transmisní elektronový mikroskop I. (negativní kontrastování, kontrastování pokovováním, mrazové leptání a mrazová sublimace).
5. Preparační technika pro transmisní elektronový mikroskop II. Fixace, odvodňování a zalévání tkáňových preparátů
6. Preparační technika pro řádkovací elektronový mikroskop
7. Ultramikrotomie a příprava preparátů pro TEM
8. Příprava preparátů pro SEM (mrazová sublimace, kritický bod, alternativní metody.
9. Fotografická dokumentace v elektronové mikroskopii.
10.Ultrastruktura buňky, kriteria zachování, fixační artefakty
11. Speciální techniky: immunotechniky, značení struktur
12. Speciální techniky: mikroanalyza, RTG difrakce
13. Technické inovace v elektronové mikroskopii
Anotace
Fyzikální základy elektronové mikroskopie . Instrumentační základy transmisní elektronové mikroskopie (TEM). Ovládání transmisního elektronového mikroskopu. Instrumentační základy řádkovací (skanovací) elektronové mikroskopie (SEM). Ovládání řádkovacího elektronového mikroskopu.Preparační technika pro transmisní elektronový mikroskop I.
(negativní kontrastování, kontrastování pokovováním, mrazové leptání a mrazová sublimace). Preparační technika pro transmisní elektronový mikroskop II. Fixace, odvodňování a zalévání tkáňových preparátů. Preparační technika pro řádkovací elektronový mikroskop. Ultramikrotomie a příprava preparátů pro TEM. Příprava preparátů pro SEM (mrazová sublimace, kritický bod, alternativní metody. Fotografická dokumentace v elektronové mikroskopii. Ultrastruktura buňky, kriteria zachování, fixační artefakty Speciální techniky: immunotechniky, značení struktur, mikroanalýza, RTG difrakce.
Kurz probíhá turnusově a skládá z několika přednášek (teoretické části) a několika úloh praktické části.
Odborná literatura:
Kalina T., Pokorný V. Základy elektronové mikrokopie, skriptum, Univerzita Karlova, Praha 1975. V. Prosser a kol. Experimentální metody biofyziky. Academia, Praha 1989.(kapitola 5, s. 262-310)
Bozzola J.J., Rusell,L.D. Electron Microcopy. Jones and Bartlett Publishers, Boston, London, 1991. Dykstra M.J. A Manual of Applied Techniques for Biological Electron Microscopy. Plenum Press, 1993.
MJ Dykstra, LE Reuss: Biological Electron Microscopy – Theory, Techniques and Troubleshooting. 2nd Edition. Kluwer Academic Plenum Publisher. ISBN 0-306-47749-1. 2003