Abstrakt
Naším cílem je popsat nové plísňové nitrilasy, jejichž sekvence byly zveřejněny, ale jejichž katalytické vlastnosti byly neznámé. Přizpůsobili jsme pro exprese v E. coli tři geny a potvrdili, že enzymy působí na organické nitrily.
Přístup v prohledávání genomu byl použit k vyhledávání nitrilas ve vláknitých houbách. Syntetické geny pro kódování nitrilas v Aspergillus niger, Gibberella moniliformis a Neurospora crassa byly exprimovány v Escherichia coli.
Toto je první heterogenní exprese houbových enzymů tohoto typu. Rekombinantní enzym pocházející z G. moniliformis byla aromatická nitrilasa s aktivitou U 390 l-1 kultury s benzonitrilem jako substrátem.
Toto bylo mnohem méně, než aktivity rekombinantních enzymů získaných z A. niger a N. crassa, které měli aktivity 2500 a 2700 U l-1 kultury, respektive s phenylacetonitrile jako substrátem.