Abstrakt
Popisujeme nový postup při detekci proteinových interakcí v cytoplasmatické membráně kvasinky Saccharomyces cerevisiae využívající FRET-FLIM (Fluorescence Lifetime IMaging) techniku. FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer-fluorescenční rezonanční přenos energie) je jedna z hlavních technik používaných k prokázání proteinových interakcí.
V případě přenosu energie (FRET) mezi fluorescenčním donorem a akceptorem dochází ke zkrácení doby života fluorescence u donoru fluorescence. FLIM umožňuje vizualizaci tohoto zkrácení doby života fluorescence v buňce in vivo.
Za použití tohoto přístupu se nám podařilo prokázat vzájemnou interakci některých z Ato proteinů v membráně buněk pocházejících z kolonií v alkalické fázi vývoje.