V 16. století se Jednota bratrská významně rozvíjela a otevřela se světu. Její kněží se vzdělávali na západních evropských univerzitách a školách a zástupci se aktivně podíleli na veřejném životě v českém království.
Současně Jednota dosáhla určité originality, která nebyla vždy v souladu s učením jiných evangelíků.