Intracelulární lokalizace, glykosylace a katalytická aktivita CYP2W1, cytochromu P450 specifického pro kolorektální nádory
Abstrakt
Cytochrom P450 2W1 (CYP2W1) je exprimován v buňkách kolorektálního karcinomu a jeho vyšší exprese koreluje s kratším přežitím pacientů. V této studii jsme charakterizovali post-translační modifikace, obrácenou (luminální) orientaci CYP2W1 v endoplazmatickém retikulu (ER) a katalytickou aktivitu CYP2W1.
Imunofluorescenční mikroskopie a biotinylační experimenty odhalily, že přibližně 8% CYP2W1 je lokalizováno na buněčném povrchu. Přes luminální orientaci CYP2W1 v membráně ER, která by měla znemožnit funkční interakci s NADPH-cytochrom P450 reduktázou, CYP2W1 v HEK 293 buňkách byl aktivní v metabolismu indolinových substrátů a byl schopen aktivovat aflatoxin B1 na cytotoxické produkty.
Tato studie poprvé identifikuje cytochrom P450 s luminální orientací v ER, který navíc vykazuje katalytickou aktivitu. Její výsledky naznačují možnost využití CYP2W1 jako molekulárního cíle v léčbě rakoviny tlustého střeva pomocí protilátek a/nebo specifických proléčiv aktivovaných CYP2W1.