Publikace na Přírodovědecká fakulta |
2010
Abstrakt
Vysoko-rozlišovací kvantitativní PCR tomografie je zcela nová metoda, která slouží k určení lokalizace RNA v biologických vzorcích, popřípadě i v jednotlivé buňce. Oocyty žab Xenopus laevis byly na kryostatu nařezány podél animálně-vegetální osy na 30µm řezy.
Následovala izolace celkové RNA a její přepis do cDNA. Ke kvantifikaci 33 genů byla použita mikrofluidní qPCR platforma BiomarkTM (Fluidigm), kde na dynamickém čipu 48x48 lze kvantifikovat více než 2300 vzorků v jednom kroku.
Výsledkem je obraz prostorového rozložení maternálně uložené mRNA podél animálně-vegetální osy v oocytu Xenopus laevis.