Buněčný transport modifikovaných oligonukleotidů pomocí porfyrinu studovaný časově rozlišeno mikrospektrofluorimetrií a fluorescenčními zobrazovacími technikami
2011
Abstrakt
Fluorescenční mikro-zobrazování a homodynní fázově rozlišená konfokální mikrospektrofluorimetrie byly využity k monitorování transportu antisensních oligonukleotidů do 3T3 živých buněk a jejich následné vnitrobuněčné distribuce.Fosphorothioátový analog 15-mer oligothymidylátu značený ATTO 425 byl použit v komplexu s 5,10,15,20-tetrakis (1-methyl-4-pyridyl) porfyrinem (H2TMPyP4) jako mediátorem.Pro měření fluorescenčních spekter bylo využito vysokofrekvenční (do 180 MHz) analogové modulace excitační laserové diody a zisku obrazového zesilovače detektoru. Časově rozlišená fluorescenční data v širokém spektrálním oboru potvrdila zachování komplexu oligonukleotid/porfyrin a následnou vnitrobuněčnou vazbu obou komponent.