Separace a detekce směsných sériových vzorků sekvenční injekční chromatografií s vysoce rozdílnými retenčními vlastnostmi složek vůči nastaveným chromatografickým podmínkám podle vynálezu spočívá v tom, že se týž směsný vzorek odděleně separuje nejméně na dvou kolonách s různě nastavenými chromatografickými podmínkami, přičemž se ze směsného vzorku na každé koloně přednostně separují složky s podobnými retenčními vlastnostmi vůči nastaveným, pro ně optimálním chromatografickým podmínkám, a eluáty jednotlivých složek ze všech chromatografických kolon postupně prochází jednou detekční celou spektrofotometrického detektoru. Chromatografické podmínky se upravují změnou délky kolony a/nebo změnou stacionární fáze kolony a/nebo změnou složení mobilní fáze a/nebo rychlostí průtoku mobilní fáze.