Purifikovaný konjugát acetaminofenu a glutathionu je schopný indukovat oxidační stres v potkaních jaterních mitochondriích
Abstrakt
Předávkování acetaminofenem je jednou z nejčastějších příčin akutního jaterního selhání. Ačkoliv je toxický mechanismus delší dobu znám, přesto zůstává přesná příčina buněčné smrti neznámá.
Cílem naší práce bylo přípravit, purifikovat a otestovat jeden z metabolitů acetaminofenu (APAP-SG), který je obecně považován za netoxický. K přípravě jsme využili organickou syntézu následovanou purifikací s využitím preparativní chromatografie.
Konečná čistota činila >98 %. Toxický efekt připravené látky jsme testovali na izolovaných jaterních mitochondriích s využitím ROS-sondy.
Naše výsledky ukázaly, že v přítomnosti konjugátu acetaminofenu a glutathionu a substrátů pro respirační komplex I i II vzrostla produkce ROS - o 104+-13 % u 1 mM APAP-SG a o 130+-10 % u 5 mM APAP-SG v přítomnosti glutamátu a malátu v porovnání s kontrolami. Produkce ROS závislá na přítomnosti substrátu pro komplex II byla zvýšena 4x během inkubace s 5 mM APAP-SG.
Prokázali jsme, že APAP-SG je schopný indukovat produkci ROS v mitochondriích.