Charles Explorer logo
🇨🇿

Jednosměrné sekvenování PCR produktů MBL2 genu pomocí polyadenylovaného sekvenačního primeru

Publikace na Lékařská fakulta v Hradci Králové |
2012

Abstrakt

Ve skupině 24 pacientek s rekurentní vulvovaginální kandidózou a 24 zdravých žen jsme analyzovali polymorfní místa v 5' nepřekládaném konci a kodonech 52, 54 a 57 genu MBL2. Pomocí PCR jsme amplifikovali produkty o délce 317 bp, které obsahovaly všechny zmíněné polymorfní místa.

Purifikované amplikony vyly použity pro sekvenační reakce obsahující konvenční a polyadenylované přímé (forward) primery. Prokázali jsme, že polyadenylovaný primer použitý při sekvenační reakci prodlužuje čitelnost MBL2 amplikonů bez nutnosti oboustranného sekvenování, subklonování nebo reamplifikace s jiným párem primerů.

Naše předběžná data ukázala, že distribuce alel, haplotypů a genotypů genu MBL2 u osob vulvovaginální kandidózou a zdravých osob se vzájemně statisticky významně neliší.