"Alternativní" biologický materiál pro rutinní analýzu nukleových kyselin - validace preanalytické fáze vyšetření DNA
Abstrakt
Cílem naší studie je porovnat vlastnosti DNA extraktů získaných dvěma různými izolačními postupy z buněk bukální sliznice, močového sedimentu, nehtů, vlasových kořínků a periferních krevních buněk. Biologické vzorky byly získány od 24 dobrovolníků s mediánem věku 31 let (25-54 let).
Izolace DNA byla provedena fenol-chloroformovou extrakcí a pomocí separačních mikrokolonek. Nejvyšší koncentrace DNA obsahovaly extrakty z buněk periferní krve a bukální sliznice; nejnižší koncentrace DNA byly vyizolovány z vlasových kořínků.
Všechny typy extraktů měly uspokojivou čistotu. Podíl nefragmentované DNA ve vzorcích získaných mikrokolonkovou metodou byl téměř dvojnásobný v porovnání s fenolovou extrakcí.
Zastoupení nefragmentovaných molekul klesal podle biologického zdroje v následující řadě: krev - bukální sliznice - močový sediment - nehty - vlasy.