Abstrakt
Zkoumali jsme, zda genetická modifikace BCR-ABL-transformovaných myších buněk, které produkují endostatin (ES) změní jejich onkogenní potenciál. Myší buněčné linie B210, které produkují p210bcr-abl fúzní protein způsobují leukémii-jako nemoc a velmi zřídka solidní nádory po intravenózní (iv) podání.
Buňky byly transfekované plasmidem nesoucím geny pro myši ES a odolností proti blasticidinu. Transdukované buňky byly izolovány v médiích doplněných blasticidin.
Výroba ES byla stanovena pomocí Western blotting. Pro další testy byly použity, dva klony a byla testována jejich patogenita po intravenózním očkování.
Ve srovnání s rodičovskými B210 bb, byla schopnost obou genů modifikovaných buněčných klonů vyvolat smrtící leukémii značně snížena. Nicméně, myší, které nepodlehly leukémii následně podlehly solidním nádorům.
FISH odhalila přítomnost BCR-ABL fúzního genu jak u nádorů tak u sleziny. Imunohistologická vyšetřování nádorů prokázala produkci ES in vivo a buněčné linie odvozené z nádorů produkovaly zjistitelné množství ES, což ukazuje, že tvorba nádorů nebyla spojena se ztrátou ES genu.