Histochemická detekce GM1 gangliosidu s užitím B-podjednotky choleratoxinu. Vyhodnocení kritických faktorů optimálních pro in sinu detekci se zvláštním přihlédnutím k acetonové preextrakci.
Abstrakt
Srovnání histochemické detekce GM1gangliosidu na kryostatových řezech za použití B-podjednotky cholera toxinu po fixaci 4% formaldehydem a vysušeným acetonem dalo výsledky tkáňově závislé. V játrech nebyly zjistitelné žádné rozdíly odpovídající GM1 produktu mezi oběma fixacemi, zatímco studie na mozku ukázala přednosti acetonové preextrakce (následovanou formadehydem), v ostřejším obrazu ve srovnání s difusním zastřeným obrazem barvení u formaldehydu.
Bezvodé podmínky (vysušené tkáňové vzorky a bezvodý aceton) jsou klíčové faktory pro optimální detekci gangliosidů in situ při použití acetonové fixace. Ta zajišťuje účinnou fyzikální fixaci, (precipitaci, prevenci difúze in situ), zvláště v tkáních bohatých na polární lipidy, a odebrání cholesterolu, který může působit jako hydrofobní blokovací bariéra.