Abstrakt
Sco1 a Sco2 jsou mitochondriální metalošaperony mědi specifické pro cytochom c oxidázu. Oba proteiny pravděpodobně zajišťují přenos/inkorporaci iontů mědi do CuA centra na CcO podjednotce Cox2.
V této práci jsme analyzovali dopad mutace G132S v juxtamembránové oblasti Sco1 proteinu, spojené s hypertrofickou kardiomyopatií, encefalopatií, hypotonií a hepatopatií, na asemblaci CcO a tkáňové hladiny mědi. Dále jsme analyzovali obsah mědi v SURF1 a SCO2 deficientních tkáních a studovali možnou fyzickou interakci CcO a Sco1.
Zjistili jsme, že mutace G132S narušuje stabilitu mutantního Sco1, a to pravděpodobně v důsledku snížené schopnosti takového proteinu dimerizovat. Dále jsme ukázali, že podobně jako Sco1 a Sco2 deficientní tkáně, také tkáně postižené mutacemi v asemblačním faktoru CcO Surf1 mají značně snížený obsah buněčné mědi.
Nakonec jsme zjistili, že jak ko-purifikace, tak i nativní western blot naznačují, že frakce Sco1 proteinu fyzicky asociuje s holoenzymem CcO.