Využití denaturační vysokotlaké kapalinové chromatografie pro rychlou a přesnou detekci mutací v genu pro α-L-iduronidasu, které způsobují mukopolysacharidosu typ I.
2010
Abstrakt
Uvádíme využití metody denaturační vysokotlaké kapalinové chromatografie (dHPLC) pro rychlou a přesnou detekci mutací v genu IDUA. Byly optimalizovány denaturační podmínky dHPLC a podmínky pro PCR amplikonů pokrývajících všech 14 exonů a přiléhajících intronových oblastí genu IDUA.
Bylo testováno 12 mutací (5 nonsense, 4 missense, 1 delece, 2 sestřihové mutace). Všechny mutace měly jasný profil na dHPLC, což umožnilo jejich přesnou detekci.
Výsledky ukazují, že metoda je robustní a velmi přesná.