Bakteriální RTX toxiny HlyA z Escherichia coli a CyaA z Bordetella pertussis narušují biologické membrány různým mechanizmem.
Abstrakt
Práce zkoumá mechanizmus narušování biologických membrán dvěma bakteriálními RTX toxiny: HlyA z Escherichia coli a CyaA z Bordetella pertussis za použití "fluorescenční zhášecí" techniky a liposomů plněných fluorescenční sondou a zhášečem ANTS/DPX. Zjistili jsme, že oba toxiny vyvolávají postupné uvolňování vnitřního obsahu liposomů ovšem se z ásadními rozdíly v iontové selektivitě kanálu.
Zatímco HlyA vyvolává prakticky neselektivní únik materiálu, kanály tvořené CyaA jsou vysoce selektivní pro kationty. Tato selektivita je snížená u mutantní formy CyaA se záměnami v předpokládaném transmembránovém segmentu (CyaA-E509K + E516K).
Fluorescenční zhášecí technika v kombinaci s liposomy o různém průměru se zdá být vhodným nástrojem pro charakterizaci toxinů tvořících póry v biologickéch membránách.