Abstrakt
Z listů tabáku Nicotiana tabacum L. byla izolována téměř homogenní NADP-malátdehydrogenasa (dekarboxylační) [EC 1.1.1.40, NADP-ME]. Specifická aktivita enzymu byla 0,95 mol.min-1mg-1. pH optimum enzymu se pohybovalo v rozmezí pH 7,1-7,4.
Afinita enzymu k substrátu L-malátu a k NADP+ byla zjišťována v přítomnosti různých kofaktorů (Mg2+, Mn2+, Co2+, Ni2+). Hodnoty Michaelisových konstant NADP-ME pro L-malát závisely na přítomném kofaktoru, zatímco Michaelisovy konstanty enzymu pro NADP+ přítomností kofaktorů ovlivněny nebyly.
Závislost reakční rychlosti NADP-ME na koncentraci Mg2+ iontů naznačila přítomnost více jak jednoho vazebného místa enzymu pro tyto ionty. Sigmoidální závislost reakční rychlosti na koncentraci Mn2+ a hodnota Hillova koeficientu 7.5 odpovídá pozitivní kooperativitě.
V přítomnosti Co2+ a Ni2+ byl výsledek obdobný, ačkoliv kooperativita byla nižší (hodnota Hillova koeficientu byla pro Co2+ 3,0 a pro Ni2+ 1,3).