Publikace na Přírodovědecká fakulta, 1. lékařská fakulta, Matematicko-fyzikální fakulta |
2009
Abstrakt
Cílem práce bylo vytvořit rychlou a citlivou metodu detekce Paenibacillus larvae ze včelí měli založenou na PCR, která nevyžaduje časově náročné kultivační testy. Zároveň byly porovnávány různé metody extrakce spor ze včelí měli: původní metoda extrakce spor do toluenu, metoda pomocí Tween 80, metoda extrakce spor do vody, do isopropylalkoholu a do 95% etanolu.
Dále byla také hodnocena izolace DNA pro tyto různé typy extrakce spor. Nejlepší výsledek byl dosažen izolací DNA pomocí kitu Qiagen, bez tepelného ošetření.
DNA spor byla detekována pomocí PCR ještě v navážce 0.25 g včelí měli, která měla pomocí kultivačních testů v 1 g zjištěný titr 105.