Korelace exprese c-erbB-2 genu (detekce metodou FISH) s membránovou expresí erbB-2 proteinu (detekce metodou IHC) u pacientek s karcinomem mléčné žlázy
Abstrakt
Východisko. Perspektivní léčba žen s karcinomy mléčné žlázy preparátem Herceptin zaměřeným proti membránovému proteinu nádorových buněk, erbB-2 (Her2/neu), zvyšuje nároky na přesné stanovení intenzity exprese erbB-2 proteinu.
Zvýšená exprese erbB-2 proteinu je spojena se zvýšenou expresí genu c-erbB-2, nejčastěji s jeho amplifikací. Tento vztah není dostatečně ověřen pro klinicky aplikovanou diagnostiku.
Imunohistochemick á (IHC) detekce membránové exprese erbB-2 proteinu není vždy jednoznačně interpretovatelná. Cílem práce bylo vymezit vztah mezi expresí proteinu a počtem kopií c-erbB-2 genu a zjistit, zda ve sporných případech IHC detekce erbB-2 proteinu by vyšetření počtu kopií genu přineslo řešení pro indikaci k léčbě Herceptinem.
Metody a výsledky. V pilotní studii jsme vyšetřili karcinomy mléčné žlázy u 34 pacientek v průměrném věku 59 let (medián 57 let), s rozpětím od 33 do 88 let.
Ve všech vyšetřeních jsme získali tkáň z primární operace karcinomu bez předchozí onkologické léčby. Počet kopií genu c-erbB-2 jsme stanovili metodou fluorescenční in situ hybridizace (FISH).
Membránovou expresi erbB-2 proteinu jsme zjišťovali imunohistochemicky (IHC). Výsledky jsme porovnali s gradem karcinomu, se stavem hormonálních receptorů, a s nálezem v resekovaných axilárních lymfatických uzlinách.
Karcinomy jsme rozdělili podle počtu kopií c-erbB-2 genu do tří skupin. První skupina (7 případů) byla charakterizována více jak 10 kopiemi genu c-erbB-2 v jádrech nádorových buněk.
Druhá skupina (9 případů) byla charakterizována stupněm amplifikace pod 10 kopií genu c-erbB-2. Třetí skupinu (18 případů) tvořily karcinomy bez amplifikace.
Nejlépe koreloval stav genu c-erbB-2 s expresí erbB-2 proteinu u první skupiny karcinomů - silná amplifikace genu, silná exprese proteinu. Morfologický nález odpovídal u všech invazivnímu duktálnímu karcinomu, u 6 ze 7 nemocných grade 3.
Receptory pro estrogen a progesteron byly negativní u většiny karcinomů této skupiny. U pěti ze sedmi nemocných v první skupině jsme prokázali metastázy do axilárních lymfatických uzlin.
Ve druhé a třetí skupině karcinomů se slabou amplifikací genu byla exprese erbB-2 proteinu střední, slabá nebo negativní. Grade karcinomů a exprese hormonálních receptorů byly variabilní a nezjistili jsme signifikantní vztah k metastatickému postižení lymfatických uzlin v době diagnózy.
Závěr. Invazivní duktální karcinomy mléčné žlázy se silnou amplifikací genu c-erbB-2 mají silnou expresi membránového proteinu erbB-2.
Mezi amplifikací genu c-erbB-2 s počtem kopií genu nad 10 a silnou overexpresí proteinu erbB-2 je přímý vztah. Z pilotní studie vyplývá, že tyto karcinomy mají agresivnější charakter než karcinomy s nižším počtem kopií genu c-erbB-2 (méně jak 10 kopií), nebo karcinomy se dvěma signály pro gen c-erbB-2.
Exprese membránového proteinu erbB-2 je u karcinomů se slabou amplifikací nebo bez amplifikace genu c-erbB-2 slabá nebo negativní. Slabá pozitivita nebo negativní IHC výsledek však může být způsoben technickými problémy (fixace tkáně a další).
Proto stanovení počtu kopií genu c-erbB-2 je vhodné v případech slabšího nebo nejistého výsledku IHC stanovení intenzity exprese erbB-2 proteinu.