Charles Explorer logo
🇨🇿

Spektrofotometrická metoda stanovení D-laktátu v krevní plazmě a moči

Publikace |
2015

Abstrakt

Cíl studie: Cílem metodického sdělení bylo zavedení a validace dostupné a praktické enzymatické metody stanovení D-laktátu v krevní plazmě a moči. Zavedená metoda byla využita ke stanovení koncentrací D-laktátu v plazmě v souboru 117 pacientů v perioperační péči.

Typ studie: Jedná se o metodické sdělení s uvedením výsledků prospektivní observační klinické studie. Název a sídlo pracoviště: Centrum pro výzkum a vývoj, Fakultní nemocnice Hradec Králové.

Materiál a metody: Krevní plazma je deproteinována ultrafiltrací, moč je analyzována přímo. Vlastním principem metody jsou dvě spřažené enzymové reakce katalyzované D-laktát dehydrogenázou při redukci nikotinamid-adenin-dinukleotidu a D-glutamát-pyruvát transaminázou.

Měřena je konečná koncentrace redukovaného nikotinamid-adenin-dinukleotidu při 340 nm. Soubor pacientů studie byl tvořen 117 pacienty podstupujícími resekci tlustého střeva nebo konečníku pro operabilní karcinom kolorekta.

Odběry byly prováděny předoperačně, dvě hodiny po operaci a první až čtvrtý pooperační den. Výsledky: V plazmě bylo dosaženo preciznosti CV 1,5-4,9 % podle koncentrace.

Kvantifikační limit metody je na koncentraci 10 umol/l. Detekční limit metody je na koncentraci 5 umol/l.

Metoda je lineární v rozsahu 10 umol/l až 1 mmol/l. Bazální předoperační hodnoty 33,4 (26,4; 39,7) umol/l stouply již za dvě hodiny po ukončení operace na koncentraci 90,2 (78; 101) umol/l, která dosáhla vrcholu v první pooperační den a následně došlo v průběhu dalších tří dní k návratu k původním hodnotám.

Závěr: Uvedená metoda může být vzhledem ke své dostupnosti, robustnosti i jednoduchosti snadno zavedená v biochemické laboratoři, kde se vyskytne požadavek na provádění tohoto vyšetření.