Stanovení optimálního vyšetřovacího algoritmu pro efektivní vyhledávání nemalobuněčných karcinomů plic s přestavbou genu ALK - zavedení metodiky a praktické zkušenosti z rutinního vyšetřování
Abstrakt
Cílem retrospektivní (RS) části studie bylo a) nalezení imunohistochemického (IHC) postupu detekce proteinu ALK, který bude mít dostatečnou senzitivitu a specificitu, aby jej bylo možné použít jako screeningové metody při vybírání případů nemalobuněčného karcinomu plic (NSCLC) pro následné testování přestavby genu ALK metodou fluorescenční in situ hybridizace (FISH) a b) zjištění diagnostické výtěžnosti endo- a trans- bronchiálních a transtorakálních biopsií a cytobloků pro vyšetření přestavby genu ALK. Takto zjištěná optimální IHC metodika detekce exprese ALK proteinu (klon D5F3, Cell Signaling Technology, Danvers, MA, USA) byla následně ověřena v prospektivním (PS) rutinním vyšetřování pacientů s NSCLC.
ALK status byl korelován s morfologickým vzhledem tumorů a s vybranými klinickými údaji. V RS části bylo IHC a FISH vyšetřeno 170 případů EGFR-nemutovaných NSCLC.
V PS části studie bylo IHC vyšetřeno 557 případů a FISH 76 případů NSCLC. V RS souboru bylo nalezeno 8/154 (5,2 %) případů s přestavbou ALK, při PS vyšetřování pak 24/557 (4,3 %).
Senzitivita a specificita zvolené IHC screeningové metody byly v RS části 100 % a 99 %, v PS části pak 100 % a 80 %. Diagnostická výtěžnost "malých" biopsií se v RS části pohybovala v závislosti na zvolené IHC variantě v rozmezí 74 - 80 %, v PS části pak činila 88 %.
U žádného PS vyšetřovaného případu s pozitivní přestavbou ALK nebyla detekována mutace EGFR. Vysoká diagnostická výtěžnost vypovídá o možnosti testování ALK stavu i u "malých" biopsií.
Prevalence 5,2 % v RS části (EGFR nemutovaných případů) a 4,3 % v PS části (bez znalosti EGFR mutace), morfologický vzhled tumorů (solidní a acinární typ, mucinózní či alespoň parciální hlenotvorba) i nižší průměrný věk a zastoupení pohlaví u pacientů s ALK pozitivními nádory v našem PS souboru (57,5 let vs. 65,2 let, 8 mužů/16 žen vs. 336 mužů/197 žen) jsou v souladu s celosvětovými údaji.