Abstrakt
Tento protokol popisuje přípravu rekombinantního nukleokapsidového protein (NP) viru SARSCoV-2 fúzovaného s glutation-S-transferázou (GST) a jeho použití pro detekci specifických protilátek pomocí metody ELISA (z angl. enzyme-linked immunosorbent assay). SARS-CoV-2 je původcem onemocnění covid-19, které si vyžádalo již přes 6 milionů obětí (dle WHO k 20. dubnu 2022).
Příprava antigenu začala v době, kdy nebyly dostupné žádné komerční soupravy pro detekci SARS-CoV-2-specifických protilátek, kterých je nyní na trhu již řada. Jejich ceny jsou však vysoké.
Metoda přípravy antigenu ve formě GST-fúzního proteinu je levná a vhodná pro analýzu velkého množství vzorků, kde je cena důležitým aspektem. (Sehr et al. 2002; 2001). Využití rekombinantního NP umožňuje detekovat specifickou protilátkovou odpověď po prodělání covidu-19, protože tento protein není obsažen v dostupných vakcínách proti SARS-CoV-2.