Antiproliferativní a cytotoxické účinky seleničitanu sodného na buňky lidského kolorektálního karcinomu
Abstrakt
V této práci jsme sledovali antiproliferativní účinky seleničitanu sodného na buňky kolorektálního karcinomu HCT-116 s normálním p53 genotypem a na buňky HCT-116-p53 KO bez funkčního genu p53. Buněčná proliferace byla hodnocena pomocí časosběrné videomikroskopie, měření obsahu proteinů, metabolické aktivity a DNA syntézy.
Změny v buněčném cyklu byly stanoveny pomocí průtokové cytometrie a Western blottingu. Buněčná smrt byla měřena pomocí imunofluorescenční detekce kaspázy 3 a detekce štěpení PARP.
Seleničitan sodný inhiboval proliferaci buněk v závislosti na koncentraci a době působení, přičemž buňky HCT-116 byly významně citlivější než buňky HCT-116-p53KO. Buňky měly tendenci akumulovat se v G2 fázi buněčného cyklu, což bylo doprovázeno zvýšenou expresí cyklinu B1, proteinu Cdc2 p34, a p21 a zvýšením sub G1 frakce buněčného cyklu. Štěpení PARP, fragmentace jádra a aktivace kaspázy 3 byly výraznější v buňkách HCT 116, což naznačuje významnou roli p53 v odpovědi buněk na působení seleničitanu sodného