Stanovení redukovaného a oxidovaného glutathionu v biologických vzorcích s užitím kapalné chromatografie s fluorometrickou detekcí
2007
Abstrakt
Byla vyvinuta HPLC metoda ke stanovení redukované(GSH) a oxidované formy(GSSG) glutathionu v krvi,plazmě a hepatocytech izolovaných z potkana.Redukovaný glutathion reaguje s ortho-ftalaldehydem(OPA) a tvoří stabilní vysoce fluoreskující tricyklický derivát při pH 8,zatímco GSSG reaguje s OPA připH 12.Kolona Discovery C(18) byla použita k separaci.Směs methanolu a hydrogenfosforečnanu sodného,pH 6 sloužila jako mobilní fáze.Koeficienty variace při intra-assay byly 1,8 a 2,1% pro krev,2 a 1,9% pro potkaní hepatocyty,4,3 a 5,2 pro plazmu.Koeficienty variace při inter-assay byly 5,8 a 6,2% pro krev,6,6 a 7,1 % pro potkaní hepatocyty,6,9 a 7,8 pro plazmu.Limit detekce byl 14 a 5,6 fmol.